- 徐花;余静丹;王丹;温剑平;孙延波;
目的从医院污水中分离粘质沙雷菌噬菌体,并分析其生物学特性,为进一步研究针对耐药性粘质沙雷菌的噬菌体制剂提供依据。方法采用双层琼脂平板法分离纯化针对粘质沙雷菌的裂解性噬菌体,观察噬菌体对宿主菌的裂解特异性,通过负染法电镜观察噬菌体的形态结构,提取噬菌体核酸进行酶切电泳,测定噬菌体的最佳感染复数和一步生长曲线,SDS-PAGE电泳初步分析噬菌体的结构蛋白和非结构蛋白。结果从医院污水分离出7株可裂解粘质沙雷菌的噬菌体,对其中一株噬菌体(命名为ФSM9-3Y)的生物学特征进行了初步研究。电镜显示噬菌体呈蝌蚪状,头部为20面体立体对称、直径约70 nm;尾部长约50 nm。ФSM9-3Y的最佳感染复数为1。一步生长曲线表明;ФSM9-3Y的潜伏期约30 min,暴发时间70 min,暴发量为629 PFU/cell。凝胶电泳显示噬菌体基因组为双链DNA、大小约54 kb。SDS-PAGE呈现至少包括13种蛋白,相对分子质量范围在25～130 kD,其中主要蛋白的相对分子质量约为48 kD。结论此次分离的噬菌体ФSM9-3Y为裂解性噬菌体,根据形态和结构特征,粘质沙雷菌噬菌体ФSM9-3Y属于有尾病毒目,肌尾噬菌体科。
2013年02期 v.41 1-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 506K] [下载次数：199 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ] - 刘晓凡;邢家强;魏至栋;窦强;林杰;徐小明;
目的为提高兔肾细胞产量用于增加风疹病毒生产。方法 SPF级家兔肾细胞经传代培养10代,对不同代次兔肾细胞进行遗传稳定性、外源因子及兔脑原虫检测后接种风疹病毒松叶株(Matsuba strain)的试验。结果兔肾细胞产量得到提高,由1对兔肾平均生产1瓶细胞增加为8瓶,细胞核型检查传至第10代的细胞染色体数目与初代细胞一致,细胞培养物均一性提高。第0～第3代细胞病毒培养物滴度间无显著性差异,χ2检验返回相关性的P值均大于0.95。结论第1～第3代细胞培养风疹病毒与第0代相比,可获得相同滴度的病毒培养物,p3代兔肾细胞应用于疫苗生产可显著提高细胞及病毒产量。
2013年02期 v.41 7-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 299K] [下载次数：125 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 李黎;段凯;程晓毅;俞娟;
目的评价非动物源性保护剂的冻干乙型脑炎减毒活疫苗在动物体内的安全性和保护效力,以及在不同温度存放时间疫苗滴度变化。方法皮下或腹腔途径免疫小鼠后,检测体内中和抗体效价,P3株脑内或腹腔内攻击评价疫苗保护效力。于4℃和37℃在不同存放时间,观察疫苗稳定性。结果皮下或腹腔途径免疫后,小鼠体内中和抗体效价不高于1:10;P3株脑内攻击14 d后,小鼠存活率为80%以上;P3株腹腔内攻击14 d后,小鼠存活率为100%;脑内致病力,乳鼠传代返祖及异常毒性试验等疫苗安全性各项指标合格;疫苗4℃存放半年后滴度下降0.19 Log10PFU/mL;37℃下存放7 d,滴度下降0.71 Log10PFU/mL。结论非动物源性保护剂的冻干乙型脑炎减毒活疫苗在小鼠体内具有良好的安全性及免疫保护力,于4℃长期保存,疫苗滴度稳定。
2013年02期 v.41 11-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K] [下载次数：231 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 陈锦荣;
<正>已知模型抗原卵白蛋白(OVA)能用化学方法与小热休克蛋白(sHsp)笼相结合,笼的结构类似于病毒样颗粒(VLPs)。OVA-sHsp的结合效率取决于所用小分子接头的长度和化学计量及其在sHsp笼上的粘着位置。当OVA-sHsp结合物鼻内用于首次受试的小鼠时,对OVA的免疫应答加速了且强化了,1剂免疫后的5 d内有明显的OVA特异性IgG1应答,说明它可用于疫苗的开发。如果动物在OVA-sHsp结合物免疫前用不同的VLP、P22C(非复制性噬菌体衣壳)预处理,初次接触OVA的小鼠在1剂免后的第4 d就已有明显的OVA特异性IgG1应答。另外,用P22预处理的小鼠产生了高滴度的的黏膜IgA和同族型改变的OVA特异性血清IgG。
2013年02期 v.41 14页 [查看摘要][在线阅读][下载 76K] [下载次数：45 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张香玲;
<正>我们对从一名越南儿童体内分离出的来自G1P[8]型轮状病毒的减毒候选菌株制成的轮状病毒口服活疫苗做了检测,在29名健康成年人中首次对该疫苗的安全性做了试验。当确定该疫苗安全之后,我们给6～12周龄的160名儿童(分成4组)用了一定剂量后对免疫原性和安全性做了进一步研究,并制定了免疫程序。病毒滴度控制在较低剂量(106.0FFU/剂)时的程序为:免疫两次,间隔时间是两个月(2L组)和免疫三次,间隔一个月(3L组)。
2013年02期 v.41 18页 [查看摘要][在线阅读][下载 77K] [下载次数：58 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 陈锦荣;
<正>狂犬病病毒G蛋白的333位点上氨基酸的替换可决定其致病性:此位点具Arg或Lys的毒株,脑内接种后可杀死成年小鼠;而具其他氨基酸的毒株只引起非致死性感染。基于这些发现,已建立了一些狂犬病病毒弱毒株并用作主要是野生动物的口服疫苗,但考虑到有突变返回形成毒力表型的可能性,通过不只是在G蛋白内也在其他蛋白内多重突变产生的弱毒株作为安全的活疫苗应该更为适宜。作者以前曾证
2013年02期 v.41 23页 [查看摘要][在线阅读][下载 80K] [下载次数：40 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 陈锦荣;
<正>WHO建议,对生产狂犬病疫苗细胞系的纯度以及病毒株的抗原有无改变要定期进行评估。此文作者用SDS-PAGE和考马斯/银染法分析了17种市售人狂犬病疫苗的病毒及非病毒蛋白。富含的60～70 kD信号肽的质谱分析表明,在多数疫苗中人源性血清白蛋白(HSA)是主要成分,在所有检测的PVRV(Vero细胞狂犬病纯化疫苗)、HDCV(人二倍体细胞狂犬病疫苗)和PHK(原代地鼠肾)疫苗中,1剂平均含有22 mg的HSA。与之相反,在PCECV(鸡胚细胞培养的纯化疫苗)和PDEV(鸭胚狂犬病疫苗)中HSA浓度分别为前者的1/1000和测不出。
2013年02期 v.41 36页 [查看摘要][在线阅读][下载 81K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 陈锦荣;
<正>热杀死的革兰阳性枯草杆菌孢子作为流感疫苗具黏膜佐剂性的投递系统已受到评价。杀死的孢子可与H5N1病毒颗粒(NIBRG-14;进化支1)相结合,且当鼻内投递予小鼠时,引起的免疫应答不管是体液还是细胞介导的,都强于用单独病毒颗粒的免疫。评估了病毒特异的血液IgG与黏膜SigA的水平,当病毒颗粒与死孢子共免疫时,IgG2a(Th1抗体类)水平大幅度地提高。受到刺激的脾细胞中细胞因子的诱导作用也明显,这说明Th1与Th2应答是平衡的。
2013年02期 v.41 46页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K] [下载次数：42 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 陈锦荣;
<正>肉毒神经毒素(BoNT)是已知毒力最强的毒素。由肉毒杆菌产生的BoNTs有7种不同的血清型,命名为A～G。其作用是抑制乙酰胆碱的释放从而引起麻痹与死亡。天然发生的食源性中毒最常见的原因是食用不适当的罐头食品,但静脉吸毒者的创伤性肉毒中毒正在增加。由于它的强毒性,BoNT亦已成为生物恐怖主义者要使用的武器。BoNT检测的"金标准"是小鼠生物试验,这是费钱费时的试验,需要专门的设备和经培训的工作人员。这就需要一种快速而敏感的诊断法,在食源性疾病暴发或生物恐怖主义威胁事件中能为得到最低限度培训的人员使用。
2013年02期 v.41 49页 [查看摘要][在线阅读][下载 81K] [下载次数：94 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 火文;
<正>通过在亚洲(越南和孟加拉国)和撒哈拉以南的非洲(加纳、肯尼亚和马里)两地做随机、有安慰剂对照的现场试验,对TotaTeq这种五价轮状病毒疫苗(PRV)的预防儿童轮状病毒胃肠炎(RVGE)的效果做了评估。结果显示,在多国的试验中,马里现场获得了保护力结果。我们将约6、10和14周龄的婴儿以1:1的比例随机分配,分别服用3剂PRV或安慰剂。通过当地的健康中心和家仿观察,胃肠炎发作被有效遏制。最重要的研究结果是:在第三次服苗14 d后,利用Vesikari临床评分系统评得的分数如果≥11,则被定义为严重的轮状病毒胃肠炎(RVGE)。其他效果分析包括在接种后的第一年和第二年中抵抗严重RVGE的能力,以及接种至少一剂疫苗的效果。
2013年02期 v.41 60页 [查看摘要][在线阅读][下载 84K] [下载次数：107 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 房明;
诺华疫苗公司对于侵袭性脑膜炎球菌病的预防有长期的研发兴趣。单价脑膜炎球菌C群多糖结合疫苗Menjugate,是其最初取得生产许可的疫苗,系由在英国出现的一种致命的C群ST-11菌株研制而成的疫苗。而四价脑膜炎球菌ACWY多糖结合疫苗Menveo是其最近研发和取得生产许可的疫苗。
2013年02期 v.41 64页 [查看摘要][在线阅读][下载 86K] [下载次数：145 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 谷金莲;于洋;梁争论;
目的按《中国药典》2010年版三部(药典三部)标准分析生产和质控对国产抗HCV EIA试剂质量的影响。方法应用国内8家企业药典三部实施前、后生产的16批抗HCV EIA试剂,分别检测经Ortho和DiaSorin公司抗HCV试剂(EIA),Ortho和Roche公司的抗HCV试剂(CLIA),HCV RNA试剂(PCR)和CHIRON公司RIBA HCV3.0SIA确证试剂检测判定的136份抗-HCV阳性、122份阴性临床血样。结果依据药典三部规定增加反应时间的国产抗HCV EIA诊断试剂,检测临床血样的阴、阳性符合率高于药典三部实施前试剂(96.72%～100%∶91.80%～98.36%;94.12%～96.52%∶88.24%～95.59%);总符合率由92%～96%提高到97%～98%。研究发现药典三部实施后生产的8种抗HCV试剂检测临床窗口期样品仍存在个别样品漏检。结论药典三部的实施促进了国产抗HCV EIA诊断试剂质量水平的提高。
2013年02期 v.41 15-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K] [下载次数：73 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 詹骞;刘志飞;彭祥兵;宁浩然;陈雯;张爱华;杨晓明;
目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性验证;应用建立的方法检测武汉生物制品研究所有限责任公司(简称武汉公司)73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT含量。结果获得4株稳定的抗PT杂交瘤细胞株,抗体亚型均为IgG2a,抗体腹水ELISA效价达1∶106以上,均能与PT发生特异反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉和破伤风类毒素未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA的线性检测范围在2.50～80.00 ng/mL之间,酶标板内和板间变异系数均小于10%;PT的高、中、低浓度的回收率分别为97.41%、106.60%和89.98%;73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT质量浓度在50.00～150.00 ng/mL之间波动,说明中间产物的批间一致性及稳定性趋势良好。结论已成功制备了抗PT的单抗,并建立了精密性和准确性均较好的定量检测PT的双抗体夹心ELISA,可用于无细胞百日咳疫苗生产中PT的定量检测。
2013年02期 v.41 19-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：339 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 邓杰;张珂;饶海林;王智杰;赵兆;曾海鹏;李晓容;周宇;袁涛;
目的对聚乙二醇化重组人白细胞介素-6生物学活性工作标准品进行校准和稳定性研究。方法按《中国药典》三部(2010版)的要求,检测工作标准品的生物学活性,以IL-6国际标准品进行校准,并研究其在不同温度下放置的稳定性。结果聚乙二醇化重组人白细胞介素-6工作标准品经8次试验,每次分别在3个96孔板上检测生物学活性,并以国际标准品进行校准,共获得24个校准活性结果。平均生物学活性的95%可信区间为2.0×106～3.8×106AU/mL,单次测定范围为1.9×106～3.8×106AU/mL,平均可信限率为3.771%。工作标准品分别在-20℃、4℃、25℃、37℃条件下放置12个月,其生物学活性保持稳定。结论所制备的工作标准品可用于聚乙二醇化重组人白细胞介素-6中试工艺的研究和每批产品质量的评价。
2013年02期 v.41 24-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K] [下载次数：156 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张璘;张继鹏;赵一欢;徐永浩;梁艳;刘晓;杨晓东;张安山;何彦林;
目的探讨动态浊度法定量检测静注人免疫球蛋白细菌内毒素含量。方法参照《中国药典》2010年版三部附录中细菌内毒素检查法的规定,对静注人免疫球蛋白细菌内毒素含量检测方法进行了探讨,制备了标准曲线、进行了可靠性试验和干扰试验,并将动态浊度法检测结果与家兔法的结果进行了比较。结果动态浊度法测定的标准曲线的相关系数均大于0.98,静注人免疫球蛋白经16倍稀释后,干扰试验的回收率在50%～200%之间,完全消除其对鲎试剂与细菌内毒素凝集反应的干扰,并且动态浊度法与家兔法的检测结果一致。结论动态浊度法定量测定静注人免疫球蛋白中细菌内毒素含量,结果准确,操作简单,并且与家兔检查热原的结果一致。
2013年02期 v.41 28-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K] [下载次数：233 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ]
- 黄绍毅;吴蓓;
目的了解河池市流行性乙型脑炎(乙脑)的发病流行规律,为西南山区有效防控乙脑提供科学依据。方法采用描述流行病学方法分析,有关数据用统计学处理。结果 1994年以来,河池市乙脑的发病率为2.81/10万～0.30/10万,全市各个县均有病例,疾病的发展呈波浪形缓慢下降,目前,河池市乙脑的发病率已降至0.30/10万。流行范围逐步缩小,春夏为高发季节,主要集中在5-8月,发病主要集中在10岁以下的儿童,以散居儿童为主,占60.85%;其次为学生,占28.72%。结论防治乙脑应采取以预防接种及灭蚊、防蚊为主的综合性预防措施。免疫策略以乙脑疫苗全面纳入国家免疫规划,辅以定期强化免疫或查漏补种,获得最佳效果。
2013年02期 v.41 37-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 287K] [下载次数：83 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 唐宇;李慧;付红;张宁静;高丽;张晓曙;王颖;
目的总结甘肃省2010年麻疹减毒活疫苗强化免疫活动,评价麻疹强化免疫活动效果。方法收集甘肃省MV强化免疫报表数据,采用描述性方法对相关数据进行流行病学分析。结果甘肃省2010年MV强化免疫共接种1 272 003人,报告接种率和快速评估接种率均>95%;免前血清阳性率为90.34%,免后血清阳性率97.62%,免疫成功率为99.09%。结论甘肃省2010年MV强化免疫后麻疹发病显著降低,达到了预期效果。
2013年02期 v.41 41-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K] [下载次数：87 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 陈妙芬;梁洁雅;吕海韵;曾鸿;
目的分析南海区2006—2011年流行性腮腺炎流行病特征,提出流行性腮腺炎防控策略。方法采用描述性流行病学的方法,运用Excel2003软件进行分析。结果南海区2006—2011年共报告流行性腮腺炎7 084例,年平均发病率为47.69/10万。发病年龄分布以中小学生和托幼儿童为主,病例中3～5岁儿童发病占34.92%;6～14岁儿童发病占41.12%。流行性腮腺炎发病季节以5—9月为发病高峰期。结论人口的频繁流动使南海区流行性腮腺炎控制工作难度加大,免疫空白及免疫失败人群的自然积累是流行性腮腺炎发病的主要原因,高覆盖率的常规免疫结合加强免疫及有效的疾病监测系统是控制流行性腮腺炎的有效策略。
2013年02期 v.41 47-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K] [下载次数：69 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 黄凤晓;蒙建军;余水兰;黄劲松;劳伟锋;
目的掌握广西百色市1～6岁儿童在接种百白破联合疫苗(DPT)常规免疫后白喉的免疫状况,为制定白喉的防制策略提供科学依据。方法按现况研究的原理,全市12个县(区),每个县(区)各抽取150名儿童,每个县在东、西、南、北、中五个方位随机抽取5个行政村,每个行政村抽取6个年龄组(1～6岁儿童),每个年龄组抽取5名常住儿童(当地居住3个月以上),收集血清样本进行白喉抗体检测。结果全市共调查1～6岁儿童1 800名,其中白喉IgG(DTIgG)≥0.01 IU/mL有1 682人,保护率为93.44%,DTIgG平均含量为0.16 IU/mL。结论百色市1～6岁儿童接种百白破联合疫苗(DPT)后,免疫抗体居于高水平状态,并形成了牢固的免疫屏障,预测百色市近年不会有白喉流行。
2013年02期 v.41 50-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 102K] [下载次数：54 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 向玉良;李晓明;
目的了解株洲县1～14岁儿童分别接种麻疹、脊髓灰质炎疫苗后的免疫状况,评估学龄儿童的免疫水平。方法随机调查了14个乡镇接种麻疹、脊髓灰质炎疫苗的1～14岁儿童共5 613名,采用ELISA法检测麻疹抗体IgG和脊灰抗体IgG,进行统计分析。结果被监测的5 613例儿童中,脊髓灰质炎IgG阳性率为97.22%,麻疹IgG阳性率为98.52%。结论株洲县适龄儿童人群有较高的脊灰和麻疹免疫抗体水平,己形成了抵御脊灰和麻疹的免疫屏障。
2013年02期 v.41 53-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 101K] [下载次数：73 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ]